1、血清內(nèi)源性物質(zhì)
1)類風(fēng)濕因子：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA試劑盒檢測中，可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
2)補體：ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被顯露出來，使C1q可以將二者連接起來，然后形成檢測OD值偏高。
3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來，也能形成檢測OD值偏高。
2、血清外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不妥所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
1)標(biāo)本溶血
因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定作用。
2)標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因而，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同，亦可發(fā)生非特異性顯色而干擾測定作用